操作步骤如下：
方法/步骤
1
将所需试剂从微孔板中取出，放置室温(20～25℃)30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。
2
取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，保存于2～8℃。不要冷冻。
3
洗涤工作液在使用前也需回温。
4
将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5
加标准品/样本50ml到对应的微孔中，加入酶标物50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
6
小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤300ml/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。
7
加入显色液100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应30min。
8
加终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读每孔OD值。
注意事项
1
室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温(20～25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2
在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3
每种试剂使用前均需摇匀。
4
反应终止液为2M盐酸，避免接触皮肤。
5
不要使用过了有效期的试剂盒;也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6
储存条件
7
试剂变质的迹象：显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm
8
加入显色液后，一般显色时间为15～30min。若颜色较浅，可延长反应时间到35min(或更长)，但不得超过40min。反之，则减短反应时间。
9
该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
10
试剂盒保存于2～8℃，不要冷冻，将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感，因此要避光保存。
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