提取植物叶片DNA ,抽提以后的上清依然黏稠是怎么回事呀
工具/原料
植物叶片DNA
方法/步骤
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1首先植物叶片含有多糖多酚,用CTAB裂解前,应该用缓冲液漂洗,再进行裂解。
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2如果是用酚氯仿方法提基因组DNA有颜色是很正常的事。 首先,肯定不是蛋白质被吸上来了,你不放心可以少吸一点上清。
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3再是由于某些植物中富含多酚多糖类物质,当从细胞中分离出来很容易氧化而转变成溶于水相的有颜色的成分。
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4最可能的一个原因 是DNA浓度过大(DNA是长链分子 粘稠是正常的), 你可以通过紫外扫描检测,一方面看看纯度如何,另一方面计算一下其浓度就知道了是不是这个原因。
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总结:1首先植物叶片含有多糖多酚,用CTAB裂解前,应该用缓冲液漂洗,再进行裂解。2如果是用酚氯仿方法提基因组DNA有颜色是很正常的事。 首先,肯定不是蛋白质被吸上来了,你不放心可以少吸一点上清。3再是由于某些植物中富含多酚多糖类物质,当从细胞中分离出来很容易氧化而转变成溶于水相的有颜色的成分。4最可能的一个原因 是DNA浓度过大(DNA是长链分子 粘稠是正常的), 你可以通过紫外扫描检测,一方面看看纯度如何,另一方面计算一下其浓度就知道了是不是这个原因。5此外 ,也可能蛋白质没有沉淀完全,在以上紫外检测中也可知道的。如不纯,可加入氯仿异戊醇再重复变性蛋白以纯化之。
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