我们获得的引物除了一部分来自于软件设计得到的，还有绝大部分是通过查阅文献，选取文献中的引物进行合成得到的。但是鉴于目前的文献水平参差不齐，有些文献里的引物有可能存在造假或者特异性很差的情况发生，如何验证文献里的引物准确性和合适度呢，现在跟我一块学习用pubmed验证吧。
工具/原料
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pubmed
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文献中获得的引物
方法/步骤
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第二：Use my own forward primer (5'->3' on plus strand)在这一栏的空白处输入你获得引物的前导链，（比如我在文献中获得引物MD-2，rattus，ATCTGCAACTCCTCCGATGC），在Use my own reverse primer (5'->3' on minus strand)在这一栏相对应的输入后随链（比如：GCACAAATCCATTGGTTCCCT）。然后将Organism那个部位的人源性改成大鼠源性即改为Rattus（根据你获得的引物的种属来看，如果你的种属是人源性就不需要改）
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第三：完成步骤二后点击页面左下方的get primers，进入新页面。得到引物验证的结果。出现该引物的特性，转录特异性，长度和引物温度之类的所有相关指标。例子中的结果表明该条引物特异性并不是很好，有两条转录变异本。建议换一条。
注意事项
记得在organsim改成相对应的你取的引物的种属特性。